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产品列表
  • 人正常肝细胞QSG-7701 人正常肝细胞QSG-7701
    货号:iCell-h089
    规格:1×106
    价格:¥1350.00
    细胞介绍 该细胞系来自35岁女性的肝癌癌旁组织。该株细胞DNA分型在细胞系检索中找到基本匹配的细胞系,CRC数据库显示细胞名为QSG-7701,细胞号对应3131C0001000200007。Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=26116706),细胞STR位点信息:D5S818:11,12;D13S317:8,14;D7S820:12,12;D16S539:9,10;VWA :16,18;TH01:7,7;AMEL:X,X; TPOX :12,12; CSF1PO :10,10; 细胞特性 1) 来源:肝脏 2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞 (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 细胞接收后的处理 1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。 4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备RPMI-1640(推荐iCell-0002)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二.细胞处理: 1) 冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞传代可以参考以下方法: 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 下面T25瓶为例; 1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml. 2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人神经母细胞瘤细胞sh-sy5y 人神经母细胞瘤细胞sh-sy5y
    货号:iCell-h187
    规格:1×106
    价格:¥1350.00
    细胞介绍 SH-SY5Y是1970年建自骨瘤转移灶的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞系经三次克隆后的亚系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 该细胞显示中等水平的多巴胺-β-羟基酶活性。SH-SY5Y细胞的饱和密度大于1X10^6细胞/cm2。 细胞特性 1) 来源:脑神经母细胞瘤,转移部位骨髓 2) 形态:上皮细胞样,半贴壁(贴壁和悬浮同时存在)生长 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞 (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 细胞接收后的处理 1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3)半贴细胞和贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。 4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一、培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备MEM 基础培养基 (iCell-0012) 43% Ham's F-12 基础培养基 (iCell-0006) 43% 优质胎牛血清 (iCell-0500) 10% MEM NEAA非必需氨基酸 (iCell-01000) 1% Sodium Pyruvate丙酮酸钠 ( iCell-01100 ) 1% GlutaMAX-1谷氨酰胺 ( iCell-0900 ) 1% P/S青霉素-链霉素 (iCell-15140-122) 1% 备注:该细胞为贴壁和悬浮同时存在,换液和传代时需要分别回收贴壁和悬浮细胞,否则细胞会越来越少。 2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1)冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。 该细胞轻微贴壁和悬浮培养的细胞,传代可以参考以下方法: 1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 下面T25瓶为例; 1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml. 2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人卵巢癌细胞SK-OV-3 人卵巢癌细胞SK-OV-3
    货号:iCell-h195
    规格:1×106
    价格:¥1350.00
    细胞介绍 SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。 此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤,且形成与卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。 细胞特性 1) 来源:卵巢腺癌,腹水转移 2) 形态:上皮细胞样 贴壁生长 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞 (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 细胞接收后的处理 1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。 4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备McCoy's 5A(推荐iCell-0011)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二.细胞处理: 1) 冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞传代可以参考以下方法: 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 下面T25瓶为例; 1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml. 2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人结肠腺癌细胞SW480 人结肠腺癌细胞SW480
    货号:iCell-h204
    规格:1×106
    价格:¥1350.00
    细胞介绍 该细胞来源于一个50岁的男性结肠癌患者。 细胞特性 1) 来源:结直肠癌 2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞 (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 细胞接收后的处理: 1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。 4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备L15(推荐iCell-0009)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,100%;该细胞培养不能通入CO2,如果没有条件准备空气气相100%的培养箱的,可以采用不透气密封盖的T25培养瓶来培养,培养过程中每天将细胞拿出培养箱换1-2次空气。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二.细胞处理: 1) 冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞传代可以参考以下方法: 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 下面T25瓶为例; 1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml. 2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人单核细胞白血病细胞thp-1 人单核细胞白血病细胞thp-1
    货号:iCell-h213
    规格:1×106
    价格:¥1500.00
    细胞介绍 该细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用,无表面和胞质免疫球蛋白。可以用佛波醇 TPA诱导单核细胞分化。 细胞特性 1) 来源:急性单核细胞白血病,单核细胞 2) 形态:单核细胞,悬浮 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶(15ml离心管)或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞 (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 细胞接收后的处理 1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。 4)备注:收到的细胞是T25培养瓶发货的细胞,培养瓶之内的运输用培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞,收到的是15ml离心管发货的细胞,请按照下面培养操作说明进行半换液法培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备RPMI-1640(推荐iCell-0002)培养基;优质胎牛血清,10%;0.05 mM β-巯基乙醇(细胞培养级 推荐:iCell-8211);双抗,1%。 2) 参考传代比例:传代时控制细胞密度在2-4 ×105cell / mL,并在细胞生长至8-10 ×105cell / mL时进行传代。 3) 参考换液频率:传代时换液 4) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 5) 冻存液:完全培养液95%,DMSO 5%(使用该冻存液后,按照我库的经验复苏存活率约50%,复苏后需要额外培养7-10天才能恢复生长) 6) 【注意事项】: 该细胞为悬浮细胞,根据培养经验以及客户的反馈,传代时使用【半换液法】对细胞状态较为有利,因此我库建议您使用【半换液法】进行传代。 1. 您在收到我们提供的用15ml离心管(充液为完全培养基)发货的细胞后,请不要通过离心的方式收集细胞,可以先准备两个新的T25培养瓶,然后将细胞混合均匀后移入两个新的T25培养瓶中,补加培养基到10ml。放入到37℃培养箱中。 2. 您在收到的是用T25培养瓶发货的细胞,请先通过离心的方式收集细胞,然后将细胞重悬加入12ml按照说明书要求配置的完全培养基吹打均匀后移入两个新的T25培养瓶中培养即可。 3. thp-1悬浮细胞。该细胞在培养时更喜欢温和处理,培养时尽量少对细胞进行离心处理以此造成对细胞的伤害。换液时不要全培养基更换,建议您使用【半换液法】进行传代,添加细胞培养基以稀释细胞至维持密度即可。 4. 细胞对血清质量较为敏感,我库建议您使用进口大品牌优质血清进行培养。FBS不要灭活,如果细胞生长缓慢请尝试使用其他FBS或暂时将FBS浓度增加到20% 5.该细胞的培养液中需添加β-巯基乙醇(细胞培养级别),若不添加,可能会对细胞状态造成影响。 β-巯基乙醇的稳定性有限,不可将β-巯基乙醇添加到完全培养基中长期储存,在每次传代或液体添加时再添加β-巯基乙醇。 β-巯基乙醇(2-巯基乙醇)被添加到淋巴细胞或其他细胞培养物中,因为在培养基中使用的FBS中氨基酸半胱氨酸供不应求,而胱氨酸则很多。有些细胞(例如T细胞)无法将半胱氨酸转运到细胞质中,必须将其转化为半胱氨酸。β-巯基乙醇将胱氨酸还原为可被细胞转运的形式,然后转化为细胞生长所需的半胱氨酸。 β-巯基乙醇还是一种还原剂,可以分解培养中细胞产生的许多有毒代谢产物,从而改善细胞周围的环境。 6.该细胞对细胞密度较为敏感,培养、传代时请注意保持细胞密度在合适的范围(具体请参考细胞说明书)。 7..该细胞冻存后复苏率较低,冻存时请酌情提高细胞量 8.通常情况下可以通过向正在生长的细胞中添加完全培养基来维持细胞的生长,每7天可以将细胞离心并重悬于新配的培养基中,来完成细胞的全换液。 ATCC有关thp-1细胞保持细胞活力的说明 https://www.atcc.org/support/faqs/2ed94/Seeding%20density%20for%20TIB-202.aspx?device=modal (频繁的细胞计数是监测thp-1的最佳方法。这些细胞应该每2至3天通过向烧瓶中简单加入少量新鲜培养基(使它们具有条件培养基)来培养。您不需要每次都离心细胞并重新传代。当在我们的实验室中培养时,到第2天,细胞通常可以扩增到具有更多培养基的更大的烧瓶中。当细胞密度达到8×10 5个活细胞/ ml时需要进行传代。不允许细胞密度超过1×10(6)活细胞/ ml。) 二. 细胞处理: 1) 冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2) 细胞换液: 通常情况下可以通过向正在生长的细胞中添加完全培养基来维持细胞的生长,每7天可以将细胞离心并重悬于新配的培养基中,来完成细胞的全换液。 3) 细胞传代:传代时控制细胞密度在2-4 ×105cell / mL,并在细胞生长至8-10 ×105cell / mL时进行传代。 4) 细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。 下面T25瓶为例; 1,细胞冻存时,取上清,可使用血球计数板计数。 2,4min ,1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入冻存液,轻轻混匀,DMSO终浓度为5%,细胞密度2x10^6/支,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人类星形胶质细胞瘤细胞U251 MG (KO) 人类星形胶质细胞瘤细胞U251 MG (KO)
    货号:iCell-h219
    规格:1×106
    价格:¥1350.00
    细胞特性 1) 来源:胶质瘤 2) 形态:贴壁细胞 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞 (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 细胞接收后的处理 1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。 4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备DMEM高糖(推荐iCell-0001)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二.细胞处理: 1) 冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞传代可以参考以下方法: 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 下面T25瓶为例; 1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml. 2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞U251 MG/TMZ 人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞U251 MG/TMZ
    货号:iCell-h229
    规格:1×106
    价格:¥2500.00
    细胞介绍 通过外植技术衍生自恶性胶质母细胞瘤肿瘤。 细胞特性 1) 来源:U251胶质瘤耐药筛选 2) 形态:贴壁细胞 3) 含量:>1×10^6 细胞数 4) 用途:仅供科研使用。 细胞运输、保存及注意事项 复苏细胞 冻存细胞 包装 充液的T25细胞培养瓶 1mL冻存管 运输条件 常温 干冰 保存方式 75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒温细胞培养箱 -80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏 注意事项 1. 收到细胞请先就培养瓶/冻存管的外观、细胞的状态,进行拍照并保存,如有问题请及时联系我们; 2. 收到的复苏细胞,若有较多细胞飘起,可能由于运输导致。请先置于37℃细胞培养箱中静置2~4h,待细胞贴壁后再做处理; 3. 复苏细胞充液培养基为不含药物的维持培养基,收到细胞后请及时更换为完全培养基; 4. 建议收到细胞后,首先进行扩增,并冻存部分细胞以备用。 细胞耐药诱导过程 待细胞生长稳定后,开始倍增药物诱导剂量,每个剂量保持至细胞可以稳定生长至汇合度达50%以上。递增药物浓度依次为:0.125μg/mL,0.25μg/mL,0.5μg/mL,1μg/mL,2μg/mL,4μg/mL,8μg/mL,16μg/mL。约8个月后,细胞可在16μg/mL TMZ药物浓度下稳定生长,视为耐药细胞株构建成功,并命名为U251 MG/TMZ。 细胞培养试剂的配制 1)TMZ药物的配制及保存 建议将TMZ药物配制成16mg/mL的母液:即使用1mL DMSO溶液溶解16mg TMZ药物,使其完全溶解。 注意:可根据用量配置药物,并将药物分装保存,避免反复冻融导致药物失效。溶解后的TMZ,4℃保存1周,-20℃保存1个月,-80℃保存6个月。 2)冻存液的配制 90%优质胎牛血清+10%DMSO,现用现配。 3)完全培养基的配制(推荐使用iCell-h229-001b) 成分 体积/浓度 优质胎牛血清 10% 双抗 1% TMZ 0~16μg/mL DMEM培养基 补充至所需体积 细胞培养条件 气相:空气,95%;二氧化碳,5%;温度:37℃,培养箱湿度为70%~80%。 细胞处理 1)冻存细胞的复苏 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4~6mL完全培养基的离心管中混合均匀,1000rpm/min离心3~5min,弃去上清液。加入1mL完全培养基重悬细胞后,均匀铺于含6~8mL完全培养基的培养瓶(或皿)中,置于37℃恒温细胞培养箱中过夜培养。第二天显微镜下观察细胞生长情况,2~3day换液。 注意:①细胞复苏过程中,不可使用含有药物的培养基。须在细胞完全贴壁,形态完全展开,生长状态稳定后,方可根据实验需要添加TMZ药物。若加药后细胞生长状态较为缓慢,可适当降低TMZ的浓度,或使用不含TMZ的完全培养基培养至细胞生长状态较好时,再更换为所需的TMZ浓度; ②建议复苏细胞时始终穿戴防护手套和面罩,避免冻存管因温差较大而发生爆炸,造成人员伤害。 2)细胞传代(建议以同等底面积的培养瓶/皿按照1:2比例传代) ①待细胞密度达到80%~90%时,即可进行传代培养。 ②弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1次,吸净残余的PBS。 ③加入适当体积的0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶-1mL,其它培养器皿可覆盖培养底面即可),置于37℃培养箱中消化2~5min,显微镜下观察细胞细胞大部分变圆并脱落,即可轻拍培养瓶使细胞全部脱落。迅速拿回操作台,加入2倍体积的、含10%FBS的培养基中止消化。 ④将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min离心5min,弃去上清液。 ⑤向细胞沉淀中加入1~2mL完全培养基重悬细胞,轻吹混匀。将细胞悬液按1:1的比例均匀铺于2个新的培养瓶/皿中,添加6~8mL完全培养基,置于37℃恒温细胞培养箱中培养。第二天显微镜下观察细胞生长情况,2~3day换液。 注意:细胞传代过程中,不可使用含有药物的培养基。须在细胞完全贴壁,形态完全展开,生长状态稳定后,方可根据实验需要添加TMZ药物。若加药后细胞生长状态较为缓慢,可适当降低TMZ的浓度,或使用不含TMZ的完全培养基培养至细胞生长状态较好时,再更换为所需的TMZ浓度。 3)细胞冻存 ①细胞冻存时,步骤同2)细胞传代的①~④,细胞计数后,加入配制好的细胞冻存液,重悬细胞,按照1×10^6 ~ 1×107个细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 ②将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人脑星形胶质母细胞瘤U87MG 人脑星形胶质母细胞瘤U87MG
    货号:iCell-h224
    规格:1×106
    价格:¥1350.00
    细胞介绍 该细胞系由PontenJ等建立,源于恶性神经胶质瘤。裸鼠皮下接种可成瘤。 细胞特性 1) 来源:神经胶质瘤 2) 形态:上皮样,贴壁细胞 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞 (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 细胞接收后的处理 1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。 4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备MEM(推荐iCell-0012)培养基;优质胎牛血清,10%;2mM L-谷氨酰胺 ( iCell-0900 ) ;NEAA 1% (iCell-01000) ;双抗,1%。 注意事项 培养细胞的过程中细胞会发生堆叠和松散贴壁的细胞团这是正常的。需要2-3天对细胞进行一次换液以保证细胞的正常生长。该细胞贴壁较慢,复苏细胞后48h 内尽量不要移动细胞让细胞达到最佳的贴壁状态。生长过程中会悬浮细胞出现,在换液和传代过程中需要离心回收悬浮的细胞。丢弃悬浮的细胞会使细胞的密度变低,这个细胞在培养过程中不会达到100%的融合。细胞生长过密会引起贴壁的细胞变成悬浮的状态。明胶或多聚赖氨酸包被的培养瓶可以使细胞更好的贴壁。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二.细胞处理: 1)冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。 该细胞轻微贴壁和悬浮培养的细胞,传代可以参考以下方法: 1. 收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3. 将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 下面T25瓶为例; 1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml. 2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人正常肝细胞WRL68 人正常肝细胞WRL68
    货号:iCell-h227
    规格:1×106
    价格:¥1350.00
    细胞说明 该株细胞DNA分型在细胞系检索中找到完全匹配的细胞系,DSMZ数据库显示细胞名为WRL 68,细胞号对应CL-48。Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=26116706). 细胞STR位点信息:D5S818:11,12;D13S317:12,13.3;D7S820:8,12;D16S539:9,10;VWA :16,18;TH01:7,7;AMEL:X,X; TPOX :8,12; CSF1PO :9,10; 细胞特性 1) 来源:人的肝组织 2) 形态:贴壁生长 3) 含量:>1x10^6 细胞数 4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5) 用途:仅供科研使用。 运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞 (1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 (2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 细胞接收后的处理 1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。 4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备MEM(推荐iCell-0012)培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二.细胞处理: 1) 冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。 对于贴壁细胞传代可以参考以下方法: 1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3.轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 下面T25瓶为例; 1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml. 2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
  • 人胆囊上皮细胞永生化  上皮细胞培养体系(PriMed-iCELL-001) 人胆囊上皮细胞永生化  上皮细胞培养体系(PriMed-iCELL-001)
    货号:iCell-001a
    规格:1×106
    价格:¥2500.00
    细胞详述 胆囊,是位于右方肋骨下肝脏后方的梨形囊袋构造,有浓缩和储存胆汁之作用。胆囊壁由粘膜、肌层和外膜三层组成。 胆囊内面以粘膜覆盖,有发达的皱襞。胆囊收缩排空时,皱襞高大而分支;胆囊充盈时,皱襞减少变矮。粘膜上皮为单层柱状,内分散分部着少量杯状细胞。胆囊粘膜细胞具有典型的吸收型细胞的特征,具有较强的吸收和浓缩功能,上皮细胞吸收胆汁中的水和无机盐,经细胞侧面的质膜转运至上皮细胞间隙内,吸收的水和无机盐通过基膜进入固有层的血管和淋巴管内。同时,胆囊粘膜亦有分泌功能,分泌粘液。 该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。 注意事项: 收到细胞后第一次传代建议1:2传代,充液培养基是维持培养基,不能用来培养细胞。 细胞特性 1) 细胞来源于人胆囊组织。 2) 细胞鉴定:细胞角蛋白19(CK-19)免疫荧光染色为阳性。 3) 经鉴定细胞纯度高于90%。 4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。 5) 细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。 产品的运输和保存 视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。 1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。 2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 产品使用 1) 本产品仅能用于科研 2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核 3) 本产品未通过用于活体诊断的审核 注意事项 1.收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。 2.收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。 3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。 4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。